環氧乙烷殘留量檢測及驗證辦法

一、目的

用氣相色譜GC-2010A型氣相色譜儀（含頂空器）進行環氧乙烷殘留量的檢測方法學的研究，證明其適用于塑料瓶環氧乙烷殘留量的檢測。

二、背景

環氧乙烷在醫療器械及衛生用品的消毒方面應用廣泛。在藥品包裝材料生產領域，口服藥用塑料瓶在內包裝后也進行環氧乙烷滅菌。環氧乙烷穿透性強，消毒后因被消毒材料對其吸附能力不同，其完全消散時間也不同。殘留的環氧乙烷對人體有一定的毒性，因此需要對滅菌后的塑料瓶進行環氧乙烷殘留的檢測。

氣相色譜法是采用氣體為流動相流經裝有填充劑的色譜柱進行分離測定的色譜方法。物質經氣化后被載氣帶入色譜柱進行分離，各組分先后進入檢測器，用數據處理系統記錄色譜信號。現采用頂空法來檢測環氧乙烷殘留。樣品在頂空器內先將環氧乙烷氣化，氣化后的環氧乙烷再進入氣相色譜中。頂空法的另外一個優點就是能提高檢測的靈敏度。

根據《醫療器械生物學評價第7部分：環氧乙烷滅菌殘留量》（ISO10993-7:2008），環氧乙烷殘留量接受標準為＜10ug/cm2。塑料瓶約20cm2/個，重量約為2.8g/個，故環氧乙烷殘留接受標準為小于72ug/g，為了提高使用安全性故將接受標準制定為小于10ug/g

參考文獻《頂空毛細管柱氣相色譜法測定口服藥用塑料瓶中環氧乙烷殘留量》（王丹丹，浙江省食品藥品檢驗所）中方法：

檢測條件為：

（1）頂空器條件：爐溫（OVENTEMP）：70℃樣品檢測時間（SAMPLINTERV）：10min

閥溫（MANIFTEMP）：80℃

管道溫度（TUBETEMP）：80℃

平衡時間（INCUBTIME）：20min

（2）氣相條件：色譜柱HP-INNOWAX柱長30m，直徑0.320mm，膜厚0.25μm

進樣口溫度：200℃

柱溫：70℃

檢測器溫度：250℃

三、范圍

本驗證方案適用于GC-2010A型氣相色譜儀（含頂空器）檢測藥用滴眼劑塑料瓶（免洗）環氧乙烷殘留量的方法學驗證。

四、組織及職責

五、內容

1系統適應性試驗：

色譜系統的適應性試驗包括理論板數（n）和拖尾因子（T）。

1）、色譜柱的理論板數（n）：用于評價色譜柱的分離效果。在檢測中的測定物質為環氧乙烷，其理論板數不得小于4000。

2）、拖尾系數（T）：用于評價色譜峰的對稱性。為保證分離效果和測量精度，環氧乙烷峰的拖尾系數應不得大于1.5。

對照品溶液的制備

取100ml容量瓶，加入約20ml的純化水，后取環氧乙烷標準品1ml加入到20ml的純化水中溶解，加純化水至100ml充分溶解并用純化水將標準品稀釋到10ug/ml、5ug/ml、2.5ug/ml、1.25ug/ml、0.62ug/ml、0.31ug/ml、0.16ug/ml、0.08ug/ml。

2專屬性：

在上述的色譜條件下，分別進樣5ml純化水、環氧乙烷標準品、環氧乙烷標準品+塑料瓶、純化水+塑料瓶。其圖譜在環氧乙烷峰附近不應有雜峰的干擾影響。

3檢測限：

取環氧乙烷標準品溶液10ug/ml連續對倍稀釋后取5ml置于頂空瓶中進行環氧乙烷殘留量檢測，直到其峰型不可辨別，此時環氧乙烷濃度為該方法的檢測限。

4線性：

將環氧乙烷標準品溶液對倍稀釋成的系列濃度的標準溶液5個，10ug/ml、5ug/ml、2.5ug/ml、1.25ug/ml、0.62ug/ml，分別取5ml置于頂空瓶中，按氣相色譜法測定。以峰面積為橫坐標，對照品濃度為縱坐標，繪制標準曲線，并求曲線相關系數R，R應大于0.99。

5準確度：

取一整個塑料瓶，剪碎后置于頂空專用瓶中，共準備9個，其中3個分別加入5ml高濃度環氧乙烷標準品溶液5ug/ml，3個分別加入5ml中濃度環氧乙烷標準品溶液2.5ug/ml，3個分別加入5ml低濃度環氧乙烷標準品溶液1.25ug/ml，按上述方法測定環氧乙烷濃度，計算加樣回收率。回收率應滿足80%~120%之間。

回收率（%）=通過峰面積計算環氧乙烷標準品溶液實際濃度（以3次的平均值計）×100%

環氧乙烷標準品溶液的理論濃度

6精密度：

1）重復性

取5ml環氧乙烷標準品溶液2.5ug/ml置于頂空瓶中，重復進樣6個，計算RSD，RSD應小于3%。

2）中間精密度

取5ml環氧乙烷標準品溶液2.5ug/ml，置于頂空專用瓶中，按上述方法測定環氧乙烷濃度，由不同人員，不同時間共計完成3次檢測，每次檢測制備3個樣品作為平行，并計算RSD。

7耐用性

考察關鍵參數隨機變動因素對結果的影響，如，頂空條件中爐溫±3℃，氣相色譜條件中柱溫±3℃。取5ml環氧乙烷標準品溶液2.5ug/ml，置于頂空專用瓶中按上述各個條件測定環氧乙烷濃度。